Ecadherin在涎腺粘液表皮样癌的表达及其与浸润转移的关系-医学检验论文

作者：李秀娟王淑强赵志刚赵立辉李鹏

【摘要】目的：细胞粘附功能下降是恶性肿瘤的关键因素，为探讨Ecadherin在涎腺粘液表皮样癌发病机制中的作用，我们了Ecadherin在涎腺粘液表皮样癌的表达情况，并其与临床病理特征的关系。：采用免疫组织化学SP法对46例涎腺粘液表皮样癌进行Ecadherin的检测。结果：Ecadherin在涎腺粘液表皮样癌中的表达强弱与癌组织的分化程度及淋巴结转移有关（P<0.05），而与患者的性别、年龄无关（P>0.05）。结论：Ecadherin表达与涎腺粘液表皮样癌的浸润转移有关，可作为一种新的肿瘤标志物，其表达对判断预后有一定的价值。

【关键词】E钙粘着糖蛋白；涎腺癌；癌/粘液表皮样；免疫组织化学

【ABSTRACT】Objective：ToexaminetheexpressionofEcadherininmucoepidetrmoidcarcinomaandanalyzetherelationshipoftumorcharacteristics.Foralteredcelladhesion,ithasacriticalroleinthedevelopmentofepithelialcancers.Methods：expressionofEcadherinproteinswasdetectedbyimmunohistochemistrySPmethodin46caseswithmucoepidermoidcarcinomainsalivarygland.Results：TheexpressionofEcadherincorrelatedwellwiththedegreeofdifferentiationandmucoepidermoidcarcinomainsalivarygland（P<0.05）.Ecadherinhadnorelationshipwithageandsex（P>0.05）.Conclusion：Ecadherinisassociatedwithinvasionandmetastasisinmucoepidermoidcarcinoma,suggestsEcadherinisanewmarkingofcarcinoma.MeasurementofEcadherinexpressionisvaluableinevaluatingtheprognosisofmucoepidermoidcarcinoma.

【KEYWORDS】Ecadherin；SalivaryGlandCancer；Carcinoma/Mucoepidermoid;Immunohistochemistry

癌细胞分离被认为是导致恶性肿瘤浸润及转移复杂过程中的第一步。在细胞间粘附因子中，有几个重要的分子已被证实，其中包括钙依赖分子“E钙粘着糖蛋白（Ecadherin）”[1]，它被认为在细胞粘附过程中起决定作用。根据粘附蛋白的结构和功能，它被分成几个亚型，它不仅促进细胞间的相互粘附，而且还能维持正常上皮细胞的形态特征[2]，它在人类多种恶性肿瘤细胞中表达减弱甚至消失。钙粘蛋白的存在与恶性肿瘤的分化程度及淋巴结转移有关，本实验就是通过免疫组化方法来研究Ecadherin在涎腺粘液表皮样癌中的表达与涎腺粘液表皮样癌的分化程度及淋巴结转移的关系。

1材料与方法

1.1材料收集1990～2002年来我院首次手术的涎腺粘液表皮样癌46例，手术切除标本46例，其中男性25例，女性21例；发病高峰为40～60岁，中位年龄49岁；有淋巴结转移的9例，无淋巴结转移的37例。对手术切除的46例标本进行取材，经10%中性甲醛溶液固定，梯度酒精脱水，石蜡包埋切片厚度4μm，HE染色，重新光镜下观察确诊。

1.2试剂采用武汉博士德生物工程工司提供的鼠抗人Ecadherin单克隆抗体。SP试剂盒，DAB显示剂均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.3方法采用SP免疫组织化学方法，染色过程严格按试剂盒规范程序进行，切片常规脱蜡至水，经0.3%过氧化氢10min，枸橼酸盐缓冲液加热抗原修复20min，正常羊血清封闭10min。吸去多余血清后滴加第一抗体（鼠抗人Ecadherin单克隆抗体）4℃孵育过夜，清洗后滴加第二抗体，37℃30min，清洗后滴加第三抗体37℃30min，DAB显色，用已知免疫组化染色阳性切片做阳性对照，以PBS代替第一抗体做阴性对照。

1.4判断标准光镜下观察Ecadherin阳性物质分布于涎腺粘液表皮样癌细胞膜上，呈棕黄色颗粒状，每张切片取10个高倍镜视野并计细胞数。阳性细胞数<10%为（-），阳性细胞数10%～25%为（+），阳性细胞数25%～75%为（++），阳性细胞数>75%为（+++）。