血管紧张素转换酶基因多态性与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征

血管紧张素转换酶基因多态性与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征

中华结核和呼吸感染1998年第8期第21卷论著

作者：肖毅黄席珍邱长春朱席琳刘怡文

单位：100730北京，中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院呼吸内科(肖毅、黄席珍)，中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室(邱长春、朱席琳、刘怡文)

关键词：激肽酶ⅱ类；基因；睡眠呼吸暂停综合征

【摘要】目的探讨血管紧张素转换酶（ace）基因多态性与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（osas）之间的关系。方法以ace基因内含子16的一个287bp的alu顺序i/d(insetion/deletion)型为多态标志，用聚合酶链反应（pc）扩增基因片段，对50例osas患者和50名正常人ace基因多态性的分布进行了观察，并结合临床特点和多导睡眠监测结果进行了分析。结果发现在中国汉族正常人群中，ace基因i/d多态ii、id、dd基因型频率分别为16％，52％，32％，其d和i等位基因频率分别为42％和58％。i/d多态分布符合hady-weinbeg定律，达到了遗传平衡，具有群体代表性。osas患者ⅱ基因型显著高于正常人，dd基因型则明显低于正常人；d和i等位基因频率分别为28％和72％，其差异也具有统计学意义。ⅱ基因型的osas患者较id基因型，最长呼吸暂停时间，最低血氧饱和度和睡眠呼吸暂停低通气指数（ahi）均较严重。另外，合并高血压的osas患者其最长呼吸暂停时间，最低血氧饱和度和ahi较无高血压的osas患者严重。结论中国汉族人osas发病与ace基因i/d多态性相关联，基因型ii和等位基因i可能是中国人osas发病的危险因素。

angiotensioniconvetingenzymegenepolymophisminchinesepatientswithobstuctivesleepapneasyndome

xiaoyi,huangxizhen,qiuchangchun,etal.sleepdisodescente,pumchospital,chineseacademyofmedicalsciences,pekingunionmedicalcollege,beijing100730

【abstact】objectivetoinvestigatetheelationshipofaninsetion/deletion(i/d)polymophismoftheangiotension-convetingenzyme(ace)genetoobstuctivesleepapneasyndome(osas).methodgenomicdnawasextactedfombloodsamplesandamplifiedbypolymeasechaineaction(pc).pcpimesweeflankingthepolymophicegionininton16oftheacegene.esultthedistibutionofthedd,id,andiiacegenotypeswas16%,52%,and32%inthecontolsubjectsand0%,56%,and44%inosaspatients,espectively.theestimatedfequenciesoftheinsetionalleleandthedeletionallelewee58%,42%inthecontolsubjectsand72%,28%inosaspatients,espectively.thediffeencesweestatisticallysignificant(p＜0.05).theosaspatientswithi/igenotypehadsignificantlylongeapneatime(p＜0.05),loweminimumsao2(p＜0.05)andmoeseveeahi(p＜0.05)thandidtheosaspatientswithi/dgenotype.conclusiontheseesultsindicatethattheiigenotypeandiallelemightbeaiskfactofoosasinchinese.

【keywods】kininaseⅱgenessleepapneasyndomes

血管紧张素ⅰ转换酶(ace)的主要功能是将血管紧张素ⅰ转换为血管紧张素ⅱ，并且灭活缓激肽。人ace基因位于染色体17q23，由26个外显子和25个内含子组成，ace基因多态性涉及一个287bp的alu重复序列的插入和缺失(insetion/deletion)。血浆和组织ace浓度和i/d多态性的d等位基因一致，如ace血浆浓度为dd＞id＞ⅱ［1］。

研究表明，ace基因dd基因型与原发性高血压有关，阻塞性睡眠呼吸暂停(osa)为高血压、心肌梗塞、中风和猝死的重要危险因素。osa和高血压之间关系密切，但两者之间的直接病因学联系没有明确建立。因此，我们假定如果高血压引起睡眠暂停，而ace基因dd基因型对高血压是一个显著的危险因素，ace基因dd基因型对阻塞性睡眠呼吸暂停患者也同样是一个危险因素。关于ace基因i/d多态性在阻塞性睡眠呼吸暂停发病中所起的作用，我们检索了1990年～1998年3月的医学数据库(medlinedatabase)，国内外均未见报道。因此，我们对50名正常人及50例osas患者ace基因多态性结合其临床特点和多导睡眠图监测结果，初步探讨中国人群ace基因多态性和osas之间的可能关系及高血压和osas之间的可能因果联系。

对象与方法

1．研究对象：正常对照组50名，经病史询问及初筛检查排除osas的健康人，无高血压，缺血性心脏病及糖尿病病史。其中男30名，女20名。50例osas患者(有高血压者30例，正常血压者20例)均符合阻塞性睡眠呼吸暂停综合征的诊断标准，排除继发性高血压、缺血性心脏病及糖尿病病史。其中男45例，女5例。

2．多导睡眠图监测：睡眠分期及诊断标准均采用黄席珍等建立的方法［2］。

3．实验方法：低渗法分离白细胞，采用酚-氯仿法提取基因组dna，pc检测ace基因i/d多态性。pc产物在2%琼脂糖凝胶中电泳，紫外灯下观察。缺失纯合子型(dd型)，仅有190bp的带型；插入纯合子型(ⅱ型)，仅有490bp的带型；缺失/插入杂合子型(i/d型)，有490bp和190bp两种带型。

4．统计学方法：两组间等位基因频率和基因型频率的比较采用卡方检验。两组间计数资料的比较采用t检验。p＜0.05为差异有显著性。

结果

一、正常人及osas患者ace等位基因频率及基因型分布

osas患者各基因型频率分布与正常对照组相比其构成差异有显著性(χ2=9.01，p＜0.025)。osas等位基因d及i的频率与正常对照组相比其分布差异有显著性(χ2=4.31，p＜0.05，表1)。

二、ace基因型与多导睡眠图结果分析

ace基因不同基因型与osas患者多导睡眠图监测结果之间的关系(表2)。

三、osas患者临床特点及多导睡眠图监测结果

表1正常人及osas患者acei/d多态基因频率

组别例数基因型频率等位基因频率

ⅰ/ⅰⅰ/dd/dⅰd

正常对照组500.32(16)0.52(26)0.16(8)0.580.42

osas组500.44(22)0.56(28)00.720.28

有高血压300.47(14)0.53(16)00.730.27

无高血压200.40(8)0.60(12)00.700.30

卡方值

=9.01

=4.31

p值

＜0.025

＜0.05

注：()为例数

表2ace基因型与多导睡眠图结果分析(±s)

ace型别ⅰ/ⅰⅰ/dp值

例数2228

最长呼吸暂停时间(s)68±2344±23＜0.01

最低血氧饱和度(%)69±1280±11＜0.01

ahi(次/小时)48±2234±26＜0.01

注：ahi：睡眠呼吸暂停低通气指数伴有高血压与不伴有高血压的osas患者，其临床特点、多导睡眠监测结果之间的比较(表3)。

讨论

我们研究发现，osas患者与正常对照组相比较，等位基因ⅰ和d的分布频率有明显差异，基因型分布亦有显著差异，osas患者的ⅱ基因型及等位基因ⅰ频率明显增多。表明我国汉族人群osas发病与ace基因相关。对不同的ace基因型的患者多导睡眠图监测结果进行比较发现，ace基因ⅱ基因型(插入纯合子型)osas患者其最长呼吸暂停时间明显延长、最低血氧饱和度明显减低、呼吸紊乱指数明显增高。表明ace基因ⅱ型的osas患者其临床表现较id型更严重，提示：ⅰ等位基因可能是其发病的易感基因。此外，有高血压的osas患者其呼吸紊乱指数、最低血氧饱和度、最长呼吸暂停时间同无高血压的osas患者相比，存在显著性差异，其临床表现更严重。

动物实验证实了一个位于大鼠染色体10的致高血压基因bp-1，而bp-1的位置相当于人染色体17q含ace基因区［3］。zee等［4］报告在澳大利亚人群i等位基因和高血压相关。而中国台湾、日本及非洲裔美国人高血压患者中d等位基因和dd基因型频率显著增加［5～7］。baley［8］认为ace基因多态性和种族起源有关，ace基因型和血压之间的关联存在种族差异。

表3osas患者临床特点和多导睡眠图监测结果(±s)

项目例数颈围(cm)bmi(kg/m2)wh最长呼吸暂停时间(s)最低血氧饱和度(%)ahi(次/小时)

有高血压30

40.6±2.7*

30±8**

0.93±0.04**

62±23***

72±12***

45±26***

无高血压2038.5±2.929±40.91±0.0641±2180±1330±19

注：*p＜0.05，**p＞0.05，***p＜0.01，bmi：体块指数，wh：腰围与臀围之别据统计，osas患者高血压的发病率高于普通人群2倍，而高血压患者中osas的患病率据估计在20%～30%。那么，两者之间的因果关系是什么？第一，高血压引起睡眠呼吸暂停。高血压患者动脉化学感受器驱动增加，引起化学控制系统的不稳定，因此导致反复的呼吸暂停发生。但它不能解释为什么osas的治疗能够使血压恢复正常，而且高血压的治疗不会导致睡眠呼吸暂停终止。第二，睡眠呼吸暂停引起高血压。有证据提示，和睡眠呼吸紊乱事件有关的短暂的血压升高可导致血压持续升高。而短暂血压升高可能和血减氧饱和度的严重程度、唤醒反应、胸内压波动以及睡眠结构的破坏有关［9］。第三，共同潜在机制。osas和高血压之间联系的共同因素之一就是肥胖。尽管并不是所有的阻塞性呼吸暂停综合征的患者都肥胖，但bmi是睡眠呼吸暂停的独立危险因素。根据我们的结果，如果原发性高血压引起睡眠呼吸暂停，那么dd基因型对osas患者也应当是显著的危险因素，但我们的结果不支持。因此，osas和高血压之间的联系可能不是高血压引起睡眠呼吸暂停。

总之，我们的结果提示ace基因插入多态性和中国人osas有关，但这种基于人群的研究有其局限性，进一步需做家族分析及受累同胞的基因连锁分析。

参考文献

1tietl,igatb,visvikiss,etal.evidence,fomcombinedsegegationandlinkageanalysis,thatavaiantoftheangiotensin-i-convetingenzyme(ace)genecontolsplasmaacelevels.amjhumgenet，1992，51:197-205.

2黄席珍，吴全有，李龙云，等．多导睡眠图临床应用．中华内科杂志，1991，30：758-760．

3hibetp,lindpaintek,beckmannjs,etal.chomosomalmappingoftwogeneticlociassociatedwithblood-pessueegulationinheeditayhypetensiveats.natue，1991，353:521-529.

4zeey,louyk,giffithsl,etal.associationofapolymophismoftheangiotensin-i-convetingenzymegenewithessentialhypetension.biochembiophysescommun，1992，184:9-15.

5moiset,takeuchiy,takeda.angiotensin-convetingenzymepolymophismandessentialhypetension.lancet，1994，343:125.

6asamoaha,yanamandak,thumontf,etal.adeletionintheangiotensinconvetingenzyme(ace)geneiscommonamongaficanameicanswithessentialhypetension.clinchimacta，1996，254:41-46.