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霍乱弧菌的质粒研究进展

时间 : 2009-12-06 23:26:36 来源:www.yxlw.org

[摘要]

陈爱平 综述 陈亢川 林成水 审校   摘要: 本文对国外报道的霍乱弧菌中的质粒携带率以及质粒决定的生物学功能进行综述。霍乱弧菌无论是O1、O139还是非O1非O139均不同程度携带质粒,这些质粒主要与菌株的耐药

陈爱平 综述 陈亢川 林成水 审校

  摘要:本文对国外报道的霍乱弧菌中的质粒携带率以及质粒决定的生物学功能进行综述。霍乱弧菌无论是O1、O139还是非O1非O139均不同程度携带质粒,这些质粒主要与菌株的耐药性有关,部分可能与菌株的致病性有一定联系。因此对霍乱弧菌进行质粒分析将是霍乱分子生物学研究的重要内容。
  关键词:霍乱弧菌;质粒;耐药性;致病性;分子流行病学
中图分类号:R378.3     文献标识码:A
文章编号:1007-2705(2000)03-0014-03

AdvancesofStudyonthePlasmidinVibriocholerae

CHENAiping,CHENKangchuan,LINChenshui
(FujianCentersforDiseaseControl,Fuzhou,350001China)

  Abstract:Thepercentageofplasmidinvibriocholerae(VC)fromdifferentcountrieswasreviewedandthebiologicalcharacteristicswereintroduced.VCwitho1,o139andnon-o1,non-o139serogrouppossessplasmids.Mostoftheplamidswereassociatedwithdrugresistanceofthestrainwhilesomeplasmidsmaycorrelatedwithpathogenicity.PlasmidanalysismayplayanimportantroleinthemolecularbiologicalstudyofVC.
  Keywords:Vibriocholerae;plasmid;drugresistance;pathogenicity;molecularepidemiology

  霍乱是一种急性肠道传染病,霍乱弧菌是其病原菌。根据菌体O抗原的不同,能引发霍乱的有O1群和O139群霍乱弧菌;O1群霍乱弧菌又包括古典生物型(CVC)和ElTor生物型(EVC)。
  细菌质粒是双链、闭环的DNA分子,是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位,存在于大多数细菌和少数真核生物中。细菌中天然携带的质粒,能在一定程度上反映菌株之间的联系。对于普遍含有多种质粒的菌株,直接采用质粒图谱分析可以达到分型的目的。而对于分子量较大的质粒,用限制性内切酶消化质粒DNA所得到的限制性片段长度多态性(RFLP),更能够反映质粒的结构特征[1]。因此质粒图谱分析一直是微生物分型和鉴定研究中经常采用的一种分子生物学方法。
  经过数十年对霍乱弧菌的研究,发现霍乱弧菌携带质粒并不是一种常有的现象。一般认为,霍乱弧菌中只有CVC才有1~2个大分子量的质粒,EVC中不存在质粒,所以对霍乱弧菌的研究一般不进行质粒图谱分析[2]。由于O139菌株的出现以及越来越多的耐药性菌株的分离,质粒的存在与否引起了人们的普遍关注。本文拟就文献中报道的霍乱弧菌质粒携带率进行比较,并简要介绍一些质粒的生物学特性。

表1 不同来源的霍乱弧菌中质粒检出情况


来源地区菌株类型标本来源质粒检出率(%)质粒大小质粒数目
印度O139临床6/173(3.5)200Kb1个
印度、孟加拉O139/12/32(37.5)2.6~35.8Md1个或多个
 O1/0//
 非O1非O139/35.0//
马来西亚O139外环境水4/4(100.0)2.0Md/
尼日利亚O1/41/86(47.6)4.5~150Kb1个或多个
孟加拉O1外环境2/51(3.9)//
乌干达O1病人10/10(100.0)130Md/
亚洲、秘鲁非O1临床、外环境21/64(33.0)低分子量/
西班牙非O1外环境26/28(92.9)1.1~74.8Md至少1个
孟加拉非O1非O139水11/51(21.5)1.7~115Md至少1个
泰国非O1非O139病人26/69(38.0)低分子量1个或多个
德国非O1病人3/21(14.0)1.7~5.2Md2个或3个
日本非O1临床、外环境8/40(20.0)//

1 质粒携带率比较

  O139菌株出现以后,霍乱弧菌大致可以分为O1群、O139群以及非O1非O139群。来源于不同地区、不同年代的菌株,其质粒携带率也存在较大差别。相当一部分的研究未能检出任何质粒,而在检出质粒的报告中,检出率也高低不齐,见表1。
  Cook从1982年孟加拉CVC及第6次大流行CVC、EVC和非产毒性O1菌株中,发现CVC存在21Md和3Md两个质粒,ElTor菌株无任何质粒,而非产毒性O1菌株具有0~3个质粒[3]。同一时期,大多数的报告都支持这样的结论。进入90年代以来,耐药菌株不断出现,并同时检出相关的质粒,O1群菌株中携带质粒的报告越来越多。
  Finch于1982~1985间从肯尼亚O1群EVC抗性株中分离到约100Md的耐药性质粒,并且证明该质粒不同于坦赞尼亚、尼日利亚、孟加拉分离到的质粒[4]。Huq从51株孟加拉O1群EVC中只发现2株外环境分离株携带质粒[5]。Olukoya1992年从尼日利亚霍乱暴发中分离的86株EVC(其中79株小川型,7株稻叶型)中共有41株携带一个或多个质粒,大小介于4.5~150Kb,是目前报道的携带率最高的菌株[6]。
  相对而言,非O1群菌株中携带质粒的报告较多。Amaro调查140株非O1VC的抗药性和质粒介导的抗性转移,从中选出28株抗性菌株有26株携带R质粒。多数菌株带有一个以上质粒,大小介于1.1~74.8Md,其中大分子量质粒(74Md左右)与抗性转移有关,并且能够在宿主菌中具有高度的稳定性[7]。Gyobu检测临床和外环境分离的非O1菌株的肠道致病性及质粒DNA,40株中有8株检出质粒DNA,但质粒的存在与肠道致病性并无多大联系[8]。
  O139霍乱弧菌出现以来,不断发现耐药株,尤其是四环素抗性菌株,因而对O139菌株中的质粒格外关注。Son从马来西亚外表水分离到4株O139霍乱弧菌,发现均有多种抗生素抗性,且携带2.0Md的不相容质粒[9]。Yamamoto从173株印度、孟加拉、泰国的临床分离株中,发现6株印度菌株具有多种抗性,进一步分析发现这6株菌株均带有一个200Kb的质粒,属于不相容C组。虽然大多数(94.8%)O139菌株对链霉素、磺胺甲基异恶唑、甲氧苄啶和O/129高度抗性,但四环素敏感株却没有发现质粒[10]。
  Nandy比较分离自印度、孟加拉不同地区O139、O1和非O1菌株的性质,发现32株O139菌株中有12株带有一个或多个35.8~2.6Md的质粒,尽管非O1非O139菌株中有35%能检出质粒,但在O1群菌株没有发现任何质粒。[11]
  Colombo在追踪1991~1994年安哥拉临床和外环境VCO1时,所有临床分离株均存在高度稳定的毒素盒(toxincassette)以及大的结合型多种抗性质粒,该质粒属于不相容C组,而外环境分离株则表现为3种不同的遗传图谱:同时存在毒素盒和质粒、只有毒素盒或二者均缺失。[12]
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