免疫重建与肿瘤治疗

免疫重建是指免疫缺陷个体经过自身调节机制或过继转输等治疗手段作用后重新建立健全有效的免疫系统的过程。已有的研究证实，人为地对机体免疫重建过程进行干预可影响重建个体的免疫功能，在抗肿瘤免疫、抗感染免疫及抑制移植排斥免疫等方面具有重要意义。

放、化疗是当今肿瘤综合治疗的重要手段，在晚期肿瘤治疗、清除残余肿瘤灶、抑制肿瘤复发和转移等方面具有重要作用。上述治疗措施在杀伤肿瘤细胞的同时，也在一定程度上破坏机体免疫系统，造成淋巴细胞减少症。分析化疗药物或放射线处理诱导的淋巴细胞减少症及后续的免疫重建过程，对我们寻找增强抗肿瘤免疫的方法具有重要指导意义。

1淋巴细胞减少症与抗肿瘤免疫

淋巴细胞减少症是一种常见的临床病理生理现象，主要表现为中枢和外周免疫器官中免疫细胞数的减低（成人外周血中淋巴细胞总数＜1000/μl,儿童（2岁以下）＜3000/μl.）。已有的研究显示，由淋巴细胞减少症而继发的免疫缺陷状态与多种临床疾病的疗效和预后密切相关。早在1970年就有研究提出，亚致死剂量的全身放射线处理能够使荷瘤小鼠发生肿瘤消退，这种作用并不依赖放射线对肿瘤细胞的直接杀伤，而是放射线造成淋巴细胞减少症的结果。后续的研究也证实，在亚致死剂量放射线处理诱导的淋巴细胞减少症的基础上，机体能够产生一定的特异性抗肿瘤免疫，导致肿瘤生长延缓或消退。

淋巴细胞减少症下，体内淋巴细胞分布发生改变。在肿瘤治疗过程中，放、化疗主要造成外周血及淋巴器官中免疫细胞减少，而对肿瘤浸润淋巴细胞影响相对较小。淋巴细胞再循环过程中，肿瘤浸润淋巴细胞进入外周组织，发生克隆增生，体内肿瘤抗原特异性T淋巴细胞比例增高，机体抗肿瘤免疫增强。小鼠过继转输模型也证实，肿瘤抗原特异性T淋巴细胞能够在淋巴细胞减少症小鼠体内大量扩增，并向肿瘤组织内浸润，杀伤肿瘤细胞，导致肿瘤发生消退。

淋巴细胞减少症下，体内淋巴细胞亚群比例发生改变。不同T淋巴细胞亚群对化疗药物或放射线处理敏感性不同也是影响机体免疫功能的原因之一。有研究证实，CD4+CD25+调节性T细胞对化疗药物环磷酰胺的杀伤作用相对敏感，化疗后体内CD4+CD25+调节性T细胞比例下调，淋巴细胞活化阈值降低，对抗原刺激敏感性增强[5]。而且，有研究认为，环磷酰胺作用后，体内CD4+CD25+调节性T细胞增生明显受到抑制，抗原刺激诱生的T淋巴细胞多为效应细胞。可见，淋巴细胞减少症的产生使机体免疫系统处于易激惹状态，有助于提高机体抗肿瘤免疫。

2T细胞自稳增生与抗肿瘤免疫

维持淋巴细胞池的稳定对获得性免疫系统至关重要。一方面，淋巴细胞池的多样性确保其能够对各种病原微生物产生免疫应答；另一方面，淋巴细胞定居的场所空间有限，淋巴细胞数仅能限定在一定范围之内。多种调节机制参与了机体淋巴细胞自稳状态的维持，如克隆选择、免疫失能、活化诱导的细胞调亡（activateinducedcelldeath,AICD）、淋巴细胞自稳增生（lymphopeniainducedproliferation,LIP）等。

淋巴细胞减少症下，外周T淋巴细胞发生自稳增生。多数研究认为这一过程需要MHC－TCR相互识别（CD4+T细胞与MHCⅡ分子相互作用，CD8+T细胞与MHCⅠ分子相互作用，提供第一信号），在体内微环境的作用下（如IL-7、IL-15、IL-2、IL-21等提供增殖信号），T淋巴细胞大量扩增以充盈淋巴细胞池。体内淋巴细胞克隆频数分布对不同淋巴细胞克隆自稳增生亦有影响，寡克隆T细胞增生明显，克隆多的T细胞增生受到一定程度的抑制，这种增殖差异对维持淋巴细胞池的多样性具有重要意义。通过对新生胸腺摘除小鼠T淋巴细胞自稳增生过程的研究，NoicoleL等发现，自稳增生的T细胞TCR多样性明显减少，对某些抗原呈低反应性，表明淋巴细胞自稳增生过程存在一定的选择性。

淋巴细胞自稳增生能使初始T细胞发生表型改变。初始T细胞过继输入淋巴细胞减少症小鼠体内后，短期内即开始大量扩增，增生的T细胞在此过程中获得记忆标志（CD44highCD45RBlowIL-2Rblow），并能维持上述记忆分子长期稳定表达。利用基因芯片对自稳增生的CD8+T细胞进行分析发现，上述细胞在增生早期即发生基因表达改变，获得抗原致敏记忆细胞的基因表达谱。

淋巴细胞自稳增生能使初始T细胞发生功能改变。研究发现，自稳增生的T细胞体内能够维持长期存活，对抗原刺激较初始细胞敏感，活化域值相对较低，具有部分记忆T细胞的功能[13]。基于自稳增生的T细胞的功能状态，肿瘤抗原甚至是自身抗原都将有可能诱导机体产生免疫应答。WolfgangD等证实，淋巴细胞自稳增生过程能够诱生肿瘤抗原特异性CD8+T细胞，增生的CD8+T细胞体外能够分泌大量INF-γ并能杀伤肿瘤细胞，体内能够诱导荷瘤小鼠发生肿瘤消退，并维持长期免疫记忆性。CecileK等则认为，淋巴细胞减少症－淋巴细胞自稳增生的反复交替，是导致小鼠发生自身免疫病的直接原因。

淋巴细胞自稳增生后相当长的一段时间内，增生的T淋巴细胞占据淋巴细胞池，随着胸腺T细胞的输出，新生的T细胞将逐渐取代自稳增生的T细胞，使机体免疫系统恢复至初始的功能状态。

淋巴细胞自稳增生的机制。淋巴细胞池的充盈与否是淋巴细胞自稳增生发生的前提。若淋巴细胞池空虚，T细胞间相互接触减少（接触抑制作用减低），促进T细胞增殖的“资源”相对增多（IL-7、IL-15、APCs等），T细胞获得增殖信号，上调表达BCL-2等抗凋亡分子，下调促凋亡分子，发生分裂增生；随着淋巴细胞池的逐渐充盈，对淋巴细胞个体而言，增殖资源减少，T细胞自稳增生减弱。反之，淋巴细胞池充盈，T细胞维持静息状态。

3肿瘤治疗中的免疫重建

肿瘤免疫生物治疗作为传统肿瘤治疗的补充，在动物实验和临床实践中都有成功的例证，但是由于肿瘤的恶性生长，肿瘤患者特别是晚期肿瘤患者常伴随不同程度的免疫功能紊乱，而放、化疗等治疗措施更加重了这一症状，在此基础上的主动、被动免疫难以产生有效的抗肿瘤免疫，限制了上述治疗手段在临床肿瘤治疗中的广泛应用。

众所周知，化疗药物剂量和疗效之间存在陡直的线性关系，即在一定范围内增加一倍的剂量可获得数倍的疗效，近年来，根据肿瘤细胞生长动力学模型（Simon-Norton数学模型）的理论，采用密集化疗（dose-densitychemotherapy）治疗晚期转移性乳腺癌已取得了成功。然而严重的血液学毒性限制了常规化疗的用药剂量，因此影响它的疗效，并且化疗特别是剂量偏大的化疗一方面杀灭体内的肿瘤细胞，另一方面也同时杀伤机体免疫细胞，降低机体的免疫功能，导致残留的肿瘤细胞在体内更易于生长、倍增，并可诱导多药耐药的发生。因此，如何在提高化疗效果的同时，健全患者的免疫功能继而增强抗肿瘤免疫是长期以来困扰人们的难题。

狭义的免疫重建是指将免疫功能正常个体的造血干细胞或淋巴细胞移植给患有免疫功能缺陷的个体，使后者的免疫功能全部或部分得到恢复。肿瘤治疗过程中，在免疫重建的基础上，结合其它免疫生物治疗手段，将大大提高肿瘤综合治疗的疗效。