【摘要】：目的本研究第一部分应用人类全基因组芯片Ⅱ（WholeGenomeBeadChip）对颅内动脉瘤（IA）的差异表达基因进行筛查,目的是寻找出与颅内动脉瘤发病可能相关的基因,有助于阐明颅内动脉瘤的发病机制。第二部分利用聚合酶链反应限制性片段长度多态性（PCRRFLP）方法进一步研究Ⅲ型胶原蛋白α1链（COL3A1）基因多态性与颅内动脉瘤发病的关系。第三部分探讨应用电解可脱性弹簧圈栓塞颅内动脉瘤以及电解可脱性弹簧圈结合Neuroform支架栓塞宽颈动脉瘤的技术要点、术前准备、术后处理、术后可能出现的并发症及其处理方法,总结血管内栓塞治疗颅内动脉瘤的临床经验。方法第一部分收集山东省立医院神经外科2003年7月至2004年5月收治的3例山东地区的颅内动脉瘤病例,手术夹闭瘤颈后切除动脉瘤标本,去除粘连组织及附壁血栓,立即投入液氮中保存。取3例脑外伤患者的颞浅动脉,投入液氮中保存作为正常对照。两组均为男2例、女1例,年龄40～60岁,术前均未经特殊治疗。依次经过抽提组织中的总RNA、总RNA的纯化、体外逆转录为cDNA、cDNA纯化、体外转录合成cRNA、cRNA纯化、基因芯片的杂交、洗脱、染色。用BeadSation进行扫描,再用BeadStudio进行数据分析,选择基因信号强度和背景信号有显著性差异的点（p值设为0.01）。为了校正不同样品上样量的微小差异和系统误差,实验数据采用了均一化（Normalize）处理,筛选出颅内动脉瘤的差异表达基因。第二部分利用聚合酶链反应限制性片段长度多态性（PCRRFLP）方法,比较98例颅内动脉瘤与116例对照者COL3A1基因第30外显子位点的基因型频率及等位基因频率的构成。第三部分临床收集窄颈动脉瘤患者76例,男31例,女45例,年龄30～78岁,平均42.56岁。
蛛网膜下腔出血者,3天内行动脉瘤血管内栓塞治疗者为急性期治疗,本组有21例;3天内未行血管内栓塞治疗者,一般于2周后血管内栓塞治疗。50例表现为突发性蛛网膜下腔出血,11例表现为眼睑下垂,偶发头痛9例,
视力障碍6例。按Hunt-Hess分级,Ⅰ级16例,Ⅱ级34例,Ⅲ级23例,Ⅳ级3例。依据动脉瘤颈绝对值和动脉瘤体/瘤颈比,76例均为窄颈动脉瘤（瘤颈≤4mm,瘤体/瘤颈比＞2）。动脉瘤大小;小型（＜5mm）39个,中型（5～10mm）36个,大型（10～20mm）5个。采用Seldinger技术,经股动脉穿刺插管,通过微导管应用电解可脱性弹簧圈（GDC）栓塞动脉瘤。宽颈动脉瘤16例,男5例,女11例,年龄34～68岁,平均46岁,其中9例表现为蛛网膜下腔出血,4例伴有进行性头痛,3例表现为
眼球运动障碍,Hunt-Hess分级,Ⅰ级3例,Ⅱ级9例,Ⅲ级4例。采用Seldinger技术,经股动脉穿刺插管,通过微导管应用Neuroform支架结合电解可脱性弹簧圈栓塞宽颈动脉瘤。结果第一部分研究结果表明,颅内动脉瘤组织与颞浅动脉组织相比,一共有174个差异表达基因。功能分析发现,与免疫炎症相关基因5个,与平滑肌细胞相关基因12个,与代谢相关基因25个,与基质重塑降解相关基因18个,与细胞凋亡相关基因2个,与凝血纤溶相关基因2个,与细胞增殖相关基因2个,与过氧化相关基因2个,癌基因1个,与细胞周期调控相关基因3个,与细胞黏附相关基因8个,与转录调控相关基因13个,与电子传递相关基因8个,与信号转导相关基因20个,与细胞代谢相关基因6个,功能未知基因47个。其中表达上调基因169个,表达下调基因5个。第二部分研究结果表明颅内动脉瘤组与对照组中基因型的构成无统计学意义（P＞0.05）,动脉瘤组A等位基因频率为23.71%,对照组A等位基因频率为15.52%,二者无统计学意义（P＞0.05）。第三部分结果表明,76例窄颈动脉瘤患者栓塞治疗结束时复查脑血管造影,100%栓塞55例,90%～99%栓塞16例,70%～90%栓塞2例,死亡2例,植物生存1例,肢体轻偏瘫4例。6例患者可见微弹簧圈尾段突入载瘤动脉约2～3mm,术后抗凝治疗3个月无异常表现。本组患者69例获得术后临床随访3～12个月,无1例再出血,动眼神经
麻痹在术后3～12个月内完全恢复。死亡2例和植物生存1例均为基底动脉顶端动脉瘤,3例患者均是在置入微导管时刺破动脉瘤,中和肝素后,快速填塞动脉瘤,术后复查颅脑CT,出血很少。16例宽颈动脉瘤患者,术后支架移位1例,血栓性栓塞1例。随访6～12个月未发现支架内狭窄。结论通过利用基因芯片技术对颅内动脉瘤组织中的差异表达基因进行大规模的分析,我们认为采用基因芯片技术平台是研究分析颅内动脉瘤发病机制的新策略。结果表明颅内动脉瘤的发生可能是一种多基因群参与的多因素综合过程,其中细胞凋亡异常、细胞信号转导、细胞外基质的降解重塑、免疫和炎症损伤及
动脉粥样硬化可能是颅内动脉瘤形成的重要分子机制,同时也发现了一些表达增高的功能未知基因,有待进一步研究。COL3A1基因rs1800255多态性可能与颅内动脉瘤的发生无相关性。血管内栓塞颅内动脉瘤创伤小、疗效好、患者痛苦小、并发症少、术后恢复快。开颅手术无法解决的动脉瘤,如巨大动脉瘤、颈内动脉海绵窦段、岩段、基底动脉、椎动脉动脉瘤可通过血管内应用GDC栓塞治疗。病情较重、全身情况差、发病急性期等不宜开颅手术者或手术夹闭失败者,可经血管内栓塞治疗。多次蛛网膜下腔出血,瘤周粘连严重,丌颅手术风险较大,也可采用此法治疗。应用Neuroform支架结合GDC栓塞治疗宽颈动脉瘤效果较好,可防止弹簧圈脱出动脉瘤腔,从而影响载瘤动脉供血,为宽颈动脉瘤的血管内栓塞治疗提供了一种可行的新方法。
