乳胶凝集试验快速诊断轮状病毒的临床应用

作者：程卫平作者单位：泰山医学院临床学院临床技能实验室，山东泰安271000

【摘要】目的研究轮状病毒快速诊断法的临床应用。方法用轮状病毒的快速鉴定试剂盒对153例1～7岁患儿的大便标本，做玻片法乳胶凝集试验，进行轮状病毒致小儿腹泻、胃肠炎的快速诊断。结果轮状病毒致小儿腹泻的阳性检出率为46.25%（37/80），致小儿胃肠炎的阳性检出率为38.36%（28/73），总阳性率为42.48%（65/153）。皆于2min内出结果。阳性结果中未发现交叉反应，亦符合临床诊断。结论该快速诊断法具有操作简便、快速、准确、特异性强、阳性率高等特点。可以在基层和农村医疗单位推广应用，它为诊断治疗轮状病毒致腹泻、胃肠炎提供了及时准确的客观依据。

【关键词】胃肠炎

TheclinicalapplicationoflatexagglutinationintherapiddiagnosisofRotavirusCHENGWei-ping（TaishanMedicalCollege,Taian271000，China）

Abstract:Objective:ToresearchintotheclinicalapplicationoftherapiddiagnosisofRotavirus.Methods:Arapiddiagnosisoffecalspecimenstakefromthe153cases1～7yearsoldchildrenwassuccessfullydeterminedbythekitforrapididentificationofRotaviruscauseofagdiarrhoeaandgastroenteristisusingtheRotaviruslatexagglutinationtest.Results:ThepositivedetectingratesofdiarrhoeaandgastroenteristispatientsbyinfectionRotaviruswere46.25%（37/80），38.36（28/73）.Totalpositiverateofthe153caseswas42.48%（65/153）.Theseresultsoftestwereobtainedwithintwominutes.Inthepositiveresults，noneofthepositivecasesshowedcrossagglutinationphenomena，completelyidentifiedwithclinicaldiagnosis.Conclusion:Theproceduresinvolvedinthetestaresimple，thediagnosisinfast，andtheresultishighaccurateandspecific.Thismethodisparticularlysuitablefortheuseinruralhospital.

Keywords:rotavirus;latexagglutination;diarrhea;gastroenteristis

自从1973年轮状病毒在人体被检测出来后，它已被证明是造成婴儿与儿童腹泻性疾病的主要病因。近十年来对轮状病毒的研究与流行病学的调查，已发现全世界因急性腹泻或胃肠炎而入院的婴儿与儿童病例中，有50%～60%是因此病毒感染所引起，在世界各地都有散发性的流行［1］。轮状病毒的快速检测，对轮状病毒所致腹泻或胃肠炎的患儿提供了及时准确的诊断客观依据，对帮助临床上治疗有很重要意义。我们应用了Murex公司的乳胶凝集试验的快速鉴定法，对来我院就医的有腹泻或胃肠炎症状的患儿进行轮状病毒的快速诊断，获得了极为满意的结果，现报告如下。

1材料与方法

（1）轮状病毒的快速诊断试剂盒：含1瓶试验乳胶悬浮液（TestLatexSuspension），1瓶质控乳胶悬浮液（ControlLatexSuspension），1瓶阳性质控抗原液（PositiveControlAntigen），1瓶抽提液（ExtractionBuffer），25个滴加标本和试剂反应用的纸板和小木棒，皆由法国Murex公司生产并提供。（2）检查标本：患儿的大便标本。

1.2.1轮状病毒乳胶凝集试验按试剂盒说明书进行。由于试剂盒是放2～8℃保存，所以首先要把试剂盒放于室温18～25℃约10min。取约1g患儿大便标本放于1支清洁玻璃试管内，再加入1ml抽提液，充分摇匀，静置5min，再充分摇匀，然后离心沉淀（3000转/min）10min，吸取上清液，滴加标本与试剂。其中TestLatex，ControlLatex各加1滴（约40μl），标本上清液约加40μl，用试剂盒内供应的小木棒搅匀，再摇动2min，然后观察结果。

1.2.2结果判断TestLatex与上清液混匀，出现一定数量的白色小凝集块，不随摇动而散开，同时ControlLatex与上清液混匀，无白色小凝集块出现，为阳性结果。TestLatex与上清液混匀，无凝块出现，摇动时混合液像白色牛奶状均匀，ControlLatex与上清液混匀，无白色小凝集块出现，为阴性结果。若是ControlLatex与上清液混合出现白色小凝集块，而TestLatex与上清液混合无白色凝集块出现，则表示是非特异反应（Non-specificReaction）或是标本取样不正确。若是TextLatex，ControlLatex与上清液混匀均出现白色凝集，则要取标本重做。如果TestLatex与上清液混匀先出现白色凝集，而ControlLatex与上清液混匀均后出现白色凝集，则结果判断为阳性，反之，则判断为阴性。

1.2.3检测对象检测2006年9月～2007年3月因腹泻症状来医院就医的患儿153例（男89例，女64例），年龄1～7岁。

共检测153例患儿，总阳性率为42.48%，其中轮状病毒致小儿腹泻的阳性检出率为46.25%，致小儿胃肠炎的阳性率为38.36%，均于2min内得出结果。阳性结果中无1例出现交叉凝集现象。

引起腹泻的病原有多种，其中轮状病毒是婴幼儿急性腹泻的主要病原。轮状病毒在自然界中分布很广，会感染多种动物，感染人的轮状病毒具有共同的族抗原。轮状病毒主要是由粪-口的传染途径而致病，多在冬季和初春流行，此特点可与细菌性痢疾区别。病毒在肠道绒毛细胞的细胞质中增殖、破坏细胞，在脱落坏死的细胞中含有大量病毒随粪便排出。因为绒毛细胞被破坏引起腹泻，造成电解质与水分的损失，所以导致脱水、酸中毒和休克。婴幼儿感染轮状病毒若不加以及时治疗，严重的丧失电解质与体液，可能会有生命危险。因此轮状病毒及时、准确地快速检测，对临床的治疗具有重要意义［2］。