急性局灶性脑挫裂伤对大鼠脑微循环及神经组织超微结构的影响

作者：王长卿岳淑敏陈晓峰王洪生薄爱华

【摘要】　　目的:探讨大鼠脑损伤后脑微循环障碍、脑缺血及神经组织超微结构的变化规律，为临床改善脑损伤后脑微循环障碍、治疗脑缺血、促进神经功能恢复提供理论依据。方法:采用Feeney's自由落体撞击法建立急性局灶性脑挫裂伤模型，共81只大鼠，随机均分为9组，每组6只行内源性过氧化物酶（EGPO）组织化学染色、脑含水量测定，并进行图象分析。每组3只电镜观察微血管内皮细胞和神经组织超微结构改变。结果:①脑损伤后30min伤区可见出血灶，伤区内无血管染色，伤区周围存在“微无血管区”。“微无血管区”的存在持续至伤后72h。②脑损伤后30min微血管面密度明显下降，伤后48h达到高峰，直到伤后168h才有所恢复，但仍未达到正常水平。③脑损伤后30min微血管平均光密度明显下降，伤后24h、48h回升，72h再次下降，至168h仍未恢复正常。④脑损伤后30min，微血管内皮细胞有轻度受损迹象，伤后2h毛细血管腔内有微绒毛形成，伤后6h微绒毛增多。伤后12～72h毛细血管腔明显狭窄。⑤脑损伤后30min，神经细胞超微结构改变不明显，随时间的延长，神经细胞超微结构逐渐恶化，至伤后168h细胞结构完全丧失。结论：EGPO组织化学染色方法能准确反应脑损伤后脑微循环的改变；脑损伤后即发生脑缺血改变，神经细胞、毛细血管内皮细胞的损害继发于脑损伤后的缺血性改变，而脑缺血的发生源于脑损伤后脑微血管结构的破坏和微循环灌注的不足。

【关键词】脑损伤；微循环；内源性过氧化物酶

【ABSTRACT】Objective:Toexplorethealterationlawofcerebralmicrocirculation,thecerebralischemiaandtheultrastructureofnervoustissueafterbraininjury,tofurnishevidenceforimprovingthedisturbanceofcerebralmicrocirculationafterbraininjuryandtreatthecerebralischemia.Methods:AcuteregionalbraintraumawasobtainedbyFeeney'sapparatus.Sixcasesineachgroupwereperformedendogenousperoxidase（EGPO）histochemicalstaining,watercontentofthebrainandthechartswereanalyzedbyCMIASsystem.Threeofthemwereobservedonthealterationofthemicroangiumendotheliocyteultrastructureandnervoustissue.Results:Thehemorrhagewasobservedatthetraumaticareaandthebloodvesselwasnotstainedaroundthetraumaticarea,“non”or“less”microvesselsareawasshowedanditcontinued72h.Thedensityofmicrovasculaturevolumefractiondeclinedat30min.Itreachedpeakat48handresumedat168h.TheMODdeclinedat30min,raisedagainat48hand72h,declinedagainat168h.Themicroangiumendotheliocytewasdamagedat30min,themicrovilliwasformedat2hand6h,andthecavumofmicrangiumwasnarrowedat1272h.Theultrastructureofnervoustissuegraduallyworsenedafterbraininjury.Conclusion:EGPOhistochemicalstainingcouldreflectcorrectlythechangesofcerebralmicrocirculation.Thebrainischemiaappearedearlyafterbraininjury,whichsubsequentlyinterfereswithmicrovascularstructureandhypoperfusionofmicrocirculation.Thedamageofnervouscellandmicroangiumendotheliocyteresultinthebrainischemia,whichsubsequentlyinterferemicrovascularstructureandhypoperfusionofmicrocirculation.

【KEYWORDS】Braininjury;Microcirculation;EGPO

2007年12月王长卿等：急性局灶性脑挫裂伤对大鼠脑微循环及神经组织超微结构的影响第6期2007年12月河北北方学院学报（医学版）第6期脑外伤后引起脑微循环障碍，继而导致损伤后脑缺血改变，已得到了越来越多的研究证实。我们通过Feeneys［1］自由落体撞击法建立大鼠局灶性脑挫裂伤动物模型，应用内源性过氧化物酶（EndogenousperoxidaseEGPO）组织化学染色方法显示脑损伤后脑微血管形态及微血液循环状态的改变，系统分析脑损伤后脑微血管内皮细胞超微结构改变，以探讨急性局灶性脑挫裂伤后脑微循环障碍的变化规律，为临床改善损伤后脑微循环障碍、促进神经功能恢复提供理论依据。

1材料与方法

1.1动物及分组成年、健康Wister大鼠81只，雄性，体重200～250g，随机分为对照组和脑损伤组，后者按损伤后不同观察时相点又分为30min、2h、6h、12h、24h、48h、72h、168h组，每组9只。

1.2实验方法

1.2.1实验操作及取材采用Feeneys自由落体撞击法致大鼠局灶性脑挫裂伤。脑损伤组用1%戊巴比妥钠按30mg/kg体重腹腔注射麻醉，右顶开颅，以750g・cm致伤力致伤；对照组开颅同损伤组，但不致伤，24h后取材。脑损伤组大鼠致伤后，按预定时相点断头处死。每组6只以损伤灶为中心冠状切开脑标本，额侧一半投入10%缓冲甲醛中固定行EGPO组织化学染色；枕侧一半行脑含水量测定。每组3只脑标本在2.5%戊二醛中固定，电镜观察微血管内皮细胞及神经细胞超微结构改变。对照组大鼠假手术后24h处死，观察指标同损伤组。