妊高征患者相关细胞黏附分子的表达研究

作者：丁芳林李丽文刘丛邱洁

【摘要】目的：探讨细胞黏附分子（CAMs）在妊娠高血压综合征（PIH，妊高征）发病中的作用及与妊高征病情严重程度之间的关系。方法：采用流式细胞术（FCM）和酶联免疫吸附法（ELISA）检测100例妊高征患者（轻度31例，中度36例，重度33例）和30例正常晚期孕妇（对照组）的可溶性血管细胞黏附分子-1（sVCAM-1）、细胞间黏附分子-1（sICAM-1）以及白细胞β2整合素（CD11b）、血小板α颗粒膜糖蛋白（CD62p）的表达水平，并进行各组统计学分析。结果：妊高征患者的sVCAM-1、sICAM-1、CD11b、CD62p表达水平均显著高于正常对照组，差异有显著性（P<0.01及P<0.05）；轻度PIH患者sICAM-1水平与对照组比较，差异无显著性（P>0.05），而其sVCAM-1、CD11b、CD62p水平与对照组比较差异有显著性（P<0.05），中度PIH患者sVCAM-1、sICAM-1、CD11b、CD62p表达水平与轻度PIH患者比较，差异有显著性（P<0.01及P<0.05），重度PIH患者sVCAM-1、sICAM-1、CD11b、CD62p水平与中度PIH患者比较，差异有显著性（P<0.01及P<0.05），相关分析显示，CD11b、CD62p与sVCAM-1及sICAM-1显著正相关（r分别为0.567、0.598、0.503、0.487，P均<0.05）。结论：血管内皮细胞损伤是妊高征的重要发病机理，血小板活化、细胞黏附分子的表达水平升高与妊高征的发生发展有关，表达水平升高越显著妊高征患者病情就越重，检测其水平对妊高征的诊断、观察病情及防止子痫的发生均有意义。

【关键词】妊娠高血压综合征；内皮细胞；损伤；细胞黏附分子；流式细胞术；酶联免疫吸附测定

〔Abstract〕ObjectiveTodiscusstheeffectofthecelladhesionmolecules（CAMs）inthepatientsofpregnancyinducedhypertensionandtherelationshipbetweenthem.Methods100casesofPIH（31casesofmildPIHpatients,36casesofmoderatePIHpatients,33casesofseverePIHpatients）and30casesofnormallatepregnancywomenweredeterminedwithFCMandELISA.EachsubjectwasdeterminedthelevelofsVCAM-1、sICAM-1、CD11bandCD62pbeforegivingthebirth.ResultsThelevelsofsVCAM-1、sICAM-1、CD11bandCD62pingroupofpregnancyinducedhypertensionweresignificantlyhigherthanthatofnormalcontrols（P<0.01orP<0.05）;thelevelsofsICAM-1hadnodifferencebetweenmildPIHpatientsandnormallatepregnancywomen（P>0.05）,butthelevelsofsVCAM-1、CD11bandCD62pwerehigherthanthatofnormalcontrols（P<0.01orP<0.05）,thelevelsofsVCAM-1、sICAM-1、CD11bandCD62pintheplasmaofmoderatePIHpatientswerehigherthanthatinmildPIHpatients（P<0.01orP<0.05）,thelevelsofsVCAM-1、sICAM-1、CD11bandCD62pintheseverePIHpatientswerehigherthanthatinmoderatePIHpatients（P<0.01orP<0.05）.CorrelationwerefoundbetweenCD11bandsICAM-1,CD11bandsICAM-1,CD62pandsVCAM-1,CD62pandsICAM-1.ConclusionEndotheliumcellinjuryplaysamajorroleinpathogenesisofPIH.Plateletactivation、CAMsmayinvolveinthepathogenesisofPIH,thelevelsoftheCAMsweremoreandmorehighinthePIHpatients.TheresearchconfirmedthatthedetectionofthemarkerswasusefulfordiagnosisandmonitoringtheclinicalcoursetoPIH,avoidingedampsiaoccurrence.

〔KeyWords〕Pregnancyinducedhypertension;Endotheliumcell;Injury;Celladhesionmolecules;Flowcytometry;Enzyme-linkedimmunosorbentassay

妊娠高血压综合征（Pregnacyinducedhypertension,PIH，妊高征）是妊娠期严重危害母婴健康的疾病，是孕产妇和围产儿主要死亡原因之一，在我国发病率已达10%。妊高征最基本的病理生理变化是全身小动脉痉挛，易发生严重的全身性并发症，如脑血管意外、DIC、妊高征性心衰、急性肾衰、胎盘早剥和胎儿宫内发育迟缓（IUGR）等，及早预防和诊治是降低PIH发病率和死亡率最好的方法。妊高征虽被发现有100多年了，但病因目前尚不清楚，所以给预防和治疗都带来了一定的难度[1]。近年来越来越多的研究显示血管内皮细胞（EC）系统的形态与功能改变与妊高征的病理过程密切相关，胎盘绒毛及脐带血管内皮细胞损伤可能是妊高征发生的重要因素。而细胞表面黏附分子（celladhesionmolecules,CAMs）表达增加是内皮细胞损伤和血小板活化的标志[2]。我们通过检测患者相关细胞黏附分子来探讨其表达水平变化与妊高征发生发展的关系。

1材料和方法

1.1临床资料

选取2004年3月至2005年10月在深圳市第二人民医院产科住院确诊的妊高征患者100例，所有入选孕妇年龄24~32岁，筛除原发性高血压、肾性高血压以及其它急性感染性并发症，并按照《妇产科学》（第5版）诊断标准分为轻度31例，中度36例，重度33例，孕期平均38.8周，平均年龄24.6岁，随机选择同期正常晚期妊娠30例为对照组，孕期平均38.3周，平均年龄25.1岁，入选两组对象在年龄、平均孕周等方面差异均无显著性，均未使用抗高血压、抗凝等药物。

1.2研究方法

1.2.1标本采集清晨空腹采取两组对象静脉血4mL，3mL不抗凝以2000r/min离心15min，分离血清-70℃冻存备检（sVCAM-1、sICAM-1）。1mL注入含有20L10%EDTAK2的试管中，立即制备供流式细胞仪检测的样本，测定管中加入CD11b-PE或CD62p-FITC，对照管加入羊抗鼠IgG1-PE或羊抗鼠IgG1-FITC，当天测定。

1.2.2仪器和试剂美国Coulter公司Epics-XL型流式细胞仪和奥地利梅里埃全自动酶标检测仪。美国ADI公司藻红蛋白（PE）和异硫氰酸荧光素（FITC）标记抗体和酶联免疫sVCAM-1，sICAM-1试剂盒。

1.2.3检测方法sVCAM-1、sICAM-1采用ELISA双抗体夹心法，试剂均美国ENDOGEN公司。CD11b和CD62p采用流式细胞术分析：①流式细胞仪的校准：调整流式细胞仪的荧光检测CV值<2%。②表达量分析：分别收集10000个细胞和10000个血小板，用LYSYS-Ⅱ软件分析CD11b和CD62p阳性表达百分率。

1.3统计学处理

数据以均数±标准差（x±s）表示，采用SPSS10.0统计软件包进行方差分析及t检验和直线相关分析。