苦参素对感染性休克大鼠肺损伤防治作用的实验研究

【摘要】　　目的观察苦参素（oxymatrine，omt）对感染性休克大鼠肺损伤的防治作用。方法采用大鼠盲肠结扎穿孔法（cecalligationandpuncture，clp）复制大鼠感染性休克模型，将56只大鼠随机分为假手术组、omt对照组、模型（clp）组、clp+omt52、26、13mg/kg剂量组、阳性对照（clp+地塞米松）组。通过观察血气、肺组织w/d比值、肺系数及肺含水量、肺病理学检查（大体改变及肺病理组织切片）等指标，对肺损伤进行评估。结果clp组较假手术组比较pao2、sao2及be值均降低（p＜0.01）；paco2、hco3、w/d比值、肺系数及肺含水量均升高（p＜0.05）。clp+omt52、26、13mg/kg剂量组及clp+地塞米松组较clp组比较pao2、sao2及be值均升高；paco2、hco3、w/d比值、pwi及肺含水量均降低（p＜0.01或p＜0.05）；clp+omt52、26、13mg/kg剂量组及大鼠双肺肉眼观察与clp组相比，体积膨大程度有所减轻，淤血较轻，颜色较浅。结论omt13、26、52mg/kg对感染性休克大鼠肺损伤性病变有明显的抑制作用。

【关键词】苦参素感染性休克肺损伤

　　thepreventiveandtherapeuticeffectsofoxymatrineonlunginjuryinaratmodelofsepticshock

　　（dept.ofpathophysiology，ningxiamed.coll，yinchuan750004）

　　abstract：objectivetoexplorethepreventiveandtherapeuticeffectsofoxymatrine（omt）onlunginjuryintheratmodelofsepticshock.methodsfifty-sixmalesdratswererandomlydividedinto7groups：shamoperationgroup，omtcontrolgroup，model（clp）group，clp+omthigh，middle-dosegroup，low-dosegroup，positivecontrolgroup.thepulmonaryfunctionwasevaluatedwithbloodgas，theratiobetweenwetweightofthelunganddryweightofthelung，pwiandpulmonarymoisturecapacity，grosschangesandpathologicalchangesexaminedwithlightmicroscopeinthepulmonarytissue.resultsomtcouldsignificantlyelevatethecontentofpao2，sao2，significantlydecreasethecontentofpaco2，hco-3（p＜0.05），significantlydecreasetheratiobetweenwetweightofthelunganddryweightofthelung，pwiandpulmonarymoisturecapacity（p＜0.05），improvetheconditionofpulmonaryhyperemia、edema，infiltrateofheterophilgranulocyteandemergeofasphyxialmembraneandalleviatetheinflammatoryreaction.conclusionomtcouldantagonizethelunginjuryinaratmodelofsepticshock.

　　keywords：oxymatrine；septicshock；lunginjury

　　感染性休克（septicshock），亦称脓毒性休克，是指由微生物及其毒素等产物所引起的脓毒病综合征（sepsissyndrome）伴休克。在感染性休克的发展过程中尤其是在全身炎症反应综合征时往往出现急性肺损伤（acutelunginjury，ali），主要表现为肺部炎症和炎症反应失控所致的肺毛细血管膜通透性增加，这是导致感染性休克病人死亡的主要原因之一。由于感染性休克发生肺损伤的详细机制尚不清楚，至今亦无有效的治疗措施［1］。有研究发现苦参素具有止痛抗炎和抗内毒素效应及调节免疫等多方面的药理作用［2］，但对感染性休克肺损伤的防治作用尚未见报道。本实验在大鼠盲肠结扎穿孔法（cecalligationandpuncture，clp）复制大鼠感染性休克模型的基础上探讨苦参素注射液对感染性休克大鼠肺损伤的防治作用。

　　1材料与方法

　　1.1实验药物

　　苦参素注射液购于宁夏启元药业有限公司，批号：060122；地塞米松购于湖北天药药业股份有限公司，批号：20070312。

　　1.2动物

　　健康雄性sd（sprague-dawlay）大鼠，清洁级，体重200～250g，由宁夏医学院实验动物中心提供。

　　1.3主要仪器

　　bp-6动物无创血压测试仪（成都泰盟科技有限公司）；avlomni全自动血气分析仪；医用离心机（北京医用离心机厂）；恒温烤箱；olympus光学显微镜；tp-100型电子天平。

　　1.4试验方法

　　将sd大鼠随机分成7组，每组8只，分别为假手术组、omt对照组、模型（clp）组、clp+omt52、26、13mg/kg剂量组和clp+地塞米松组。使用动物无创血压仪测量大鼠的鼠尾动脉压作为其基础血压。模型制备：①假手术组无菌条件下打开腹腔暴露并辨认盲肠，关腹，手术后尾静脉推注生理盐水5ml/kg（与给药组补液的容量相同）；②omt对照组无菌条件下打开腹腔暴露并辨认盲肠，关腹，手术后尾静脉推注omt26mg/kg；③模型（clp）组参照文献［3］采用clp法复制大鼠感染性休克的动物模型，大鼠腹腔注射戊巴比妥钠40mg/kg麻醉后，无菌条件下作中下腹正中切口2～3cm将盲肠移出腹腔，在血管弓内侧结扎末端20％盲肠，20号针头穿透结扎线远端阑尾根部的两侧肠壁，使少量肠内容物自穿刺处溢出，将盲肠还纳腹腔，逐层缝合关腹。术后监测鼠尾动脉压，以大鼠血压降到基础血压的2/3，脉压小于20mmhg作为判断休克状态即模型成功的标准。同时尾静脉推注生理盐水5mg/kg；④clp+omt52、26、13mg/kg剂量组clp法复制大鼠感染性休克的动物模型。手术后使用动物无创血压仪监测血压，当血压降到基础血压的2/3，脉压小于20mmhg时，尾静脉分别推注omt注射液52、26、13mg/kg；⑤clp+地塞米松组clp法复制大鼠感染性休克的动物模型，手术后使用动物无创血压仪监测血压，当血压降到基础血压的2/3，脉压小于20mmhg时，尾静脉推注地塞米松注射液10mg/kg。

　　1.5观察指标及方法

　　尾静脉给药后2h用20％的乌拉坦腹腔麻醉（10ml/kg），肝素生理盐水抗凝，开胸左心室采血测动脉血气；摘取右肺组织仔细剔除肺以外其它组织，滤纸洗干表面水分，称取肺重，计算肺系数（肺重/体重×100％），恒温烤箱烤至恒重后（60℃，48h）计算肺湿/干重比（w/d）及肺组织含水量：（1-干重/湿重）×100％。同时肉眼观察肺组织病理变化（肺淤血程度、被膜、肿大程度），取左肺组织用4％甲醛固定，石蜡切片，he染色进行肺病理组织学检查。

　　1.6统计学方法

　　数据以（±s）表示，采用spss11.5统计软件对各组参数进行单因素方差分析，结果以p＜0.05为差异有统计学意义。

　　2.1血气分析结果

　　假手术组与omt对照组比较各指标差异无统计学意义。clp组与假手术组各指标比较差异有统计学意义，其中pao2、sao2及be值均降低（p＜0.01）；paco2、hco3均升高（p＜0.05）。clp+omt52、26、13mg/kg剂量组及clp+地塞米松组与clp组各指标比较差异有统计学意义，其中pao2、sao2及be值均升高；paco2、hco3均降低（p＜0.01或p＜0.05），见表1。表1ｏｍｔ对感染性休克大鼠动脉血气的影响（略）

　　2.2肺组织w/d比值、肺系数及肺含水量测定结果

　　假手术组与omt对照组各指标比较差异无统计学意义。clp组与假手术组各指标比较w/d比值、肺系数及肺含水量均升高（p＜0.05）。clp+omt52、26mg/kg剂量组及clp+地塞米松组与clp组各指标比较差异有统计学意义，其中w/d比值、pwi及肺含水量均降低（p＜0.05），见表2。表2omt对感染性休克大鼠肺w/d比值、肺系数及肺含水量变化的影响（略）

　　2.3肺组织病理学检查